CASA，即計算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動和超活化運(yùn)動，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識別活動精子，適用于精子動力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運(yùn)動軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個精子，結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時，需精確測量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動的不同特性。精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉(zhuǎn)折角度的時均J對值?。香港計數(shù)精子分析DCL

五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子＞0.80：**后120分鐘內(nèi)活動力為Ⅲ級以上的精子＞0.60；**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多，是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***，某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等，也可使精子活動力下降。六、精子計數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1．精子計數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常，見于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2．精液多次未查到精子為無精癥，主要見于睪丸生精功能低下，先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個月后精液中應(yīng)無精子，否則說明手術(shù)失敗。3．老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。南京瀕危物種精子分析VSL精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。

擴(kuò)展性檢查：可以在某些情況下由實驗室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān)，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容，已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上，越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實驗室進(jìn)行，但一些男科實驗室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響，泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評估。本手冊納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。

CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn)，但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.1標(biāo)本的采集與制作（1）采集前禁欲2?7天，禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。（2）容器要清潔。（3）特殊情況下，*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套，普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。（4）注意保溫（20?37℃），并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。（5）標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性，因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。（6）密切注意**液化的情況，確保液化時間準(zhǔn)確，因**樣本隨放置時間的延長，精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間，然后進(jìn)行分析。（7）檢測精子活動力，標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的標(biāo)本，通常會增加碰撞的頻率，并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下，建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，擺動性（WOB）?：實際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動值。

在精子形態(tài)學(xué)檢查中，通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析，有些特征（細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇，這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計算機(jī)輔助**分析具有較好的可靠性、重復(fù)性和穩(wěn)定性，與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡目測估計相比，更具有快速方便、對比性強(qiáng)、便于交流等明顯優(yōu)點(diǎn)[11]，常規(guī)**檢查無法測定精子微細(xì)運(yùn)動特點(diǎn)，顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn)，部分手工**檢查正常的不育患者，進(jìn)行**全自動分析及生化檢測，均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此，CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗方面具有重要的實際應(yīng)用意義。全自動精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢。美國前向運(yùn)動精子分析DCL

IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。香港計數(shù)精子分析DCL

通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。香港計數(shù)精子分析DCL