化妝品原料過(guò)敏性檢測(cè)需遵循嚴(yán)格的流程與標(biāo)準(zhǔn)。以LLNA為例：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：設(shè)置不同濃度梯度（通常3-5組），每組至少5只小鼠，同時(shí)設(shè)陰性（溶劑）和陽(yáng)性（如2,4-二硝基氯苯）對(duì)照組。操作步驟：將原料溶液涂抹于小鼠耳部，連續(xù)3天，第6天處死小鼠并分離淋巴結(jié)，通過(guò)放射性同位素標(biāo)記或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖情況。結(jié)果判定：計(jì)算刺激指數(shù)（SI），若SI≥3則判定為陽(yáng)性。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)如OECD TG 429、歐盟化妝品法規(guī)（EC）No 1223/2009均對(duì)檢測(cè)方法、數(shù)據(jù)解讀作出明確規(guī)定，確保結(jié)果可重復(fù)性與可靠性。美白化妝品人體功效測(cè)試的發(fā)展可以推動(dòng)行業(yè)的規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化，促進(jìn)行業(yè)的健康發(fā)展?；瘖y品新原料評(píng)價(jià)公司

斑馬魚(yú)原產(chǎn)于亞洲南部，經(jīng)常分布于印度、孟加拉國(guó)、尼泊爾等國(guó)家，是一種小型熱帶淡水魚(yú)，具有易飼養(yǎng)、繁殖能力強(qiáng)、發(fā)育快、受精卵透明、易于觀察等特點(diǎn)。斑馬魚(yú)作為模式生物的一部分，與人類基因組有高達(dá)87%的同源性4。自20世紀(jì)30年代以來(lái)，斑馬魚(yú)被確立為發(fā)育和繁殖研究的模型四。隨著斑馬魚(yú)技術(shù)的發(fā)展，斑馬魚(yú)模型逐漸被應(yīng)用于毒理學(xué)、藥物篩選、環(huán)境污染等研究。近年來(lái)，斑馬魚(yú)作為一種新興的模型被常常應(yīng)用于化妝品及其原材料的功效評(píng)價(jià)中。歐盟委員會(huì)指57%0/63/EU允許在斑馬魚(yú)胚胎和早期幼魚(yú)階段(受精后5天之前)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而不受動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的監(jiān)管[。這是因?yàn)樵缙诎l(fā)育階段的斑馬魚(yú)胚胎幾乎沒(méi)有疼痛感，斑馬魚(yú)模型符合3R原則。2021年4月9日，國(guó)家藥監(jiān)局頒布了《化妝晶功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》，此外，國(guó)內(nèi)多項(xiàng)使用斑馬魚(yú)模型進(jìn)行化妝品功效評(píng)價(jià)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)也被發(fā)布，這些舉措使得斑馬魚(yú)逐漸成為了化妝品領(lǐng)域高度認(rèn)可的評(píng)價(jià)模型之一間?；瘖y品局部刺激性試驗(yàn)單獨(dú)資料室采用加密存儲(chǔ)系統(tǒng)，保障化妝品測(cè)試數(shù)據(jù)的隱私性與可追溯性。

雖然中國(guó)化妝品行業(yè)的科技創(chuàng)新熱情和研發(fā)投入近幾年來(lái)都在快速上升，但整體的創(chuàng)新能力還比較弱。作為全球化妝品增量的市場(chǎng)之一，國(guó)內(nèi)的高級(jí)化妝品市場(chǎng)還是以外資品牌為主，本土品牌大都忙于在中低端市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)。產(chǎn)品同質(zhì)化嚴(yán)重、企業(yè)對(duì)產(chǎn)品缺乏內(nèi)驅(qū)性的要求以及缺乏新質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)力已經(jīng)成為制約眾多國(guó)產(chǎn)化妝品品牌發(fā)展的主要因素。在外部經(jīng)濟(jì)尚不平穩(wěn)、原材料價(jià)格波動(dòng)的國(guó)際大環(huán)境下，既往依靠“價(jià)格戰(zhàn)”的低價(jià)競(jìng)爭(zhēng)方式正在慢慢失去它昔日一度穩(wěn)固的市場(chǎng)抗風(fēng)險(xiǎn)能力。中國(guó)化妝品行業(yè)亟需在科技創(chuàng)新方面的突破來(lái)獲得新的發(fā)展動(dòng)力，既要搶占中國(guó)的高級(jí)市場(chǎng)，也要勇敢地在更廣闊的全球市場(chǎng)中去拼搏。

斑馬魚(yú)肥大細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能與人類相似，為抗過(guò)敏功效評(píng)價(jià)提供了體內(nèi)模型。實(shí)驗(yàn)通過(guò)N-苯甲酰-DL-精氨酸對(duì)硝基苯酰胺鹽酸鹽（BAPNA）底物法檢測(cè)類胰蛋白酶活性，定量評(píng)估過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)度。例如，某含燕麥生物堿的乳液可使斑馬魚(yú)胚胎類胰蛋白酶表達(dá)量降低58%，且過(guò)敏癥狀（如心率異常、運(yùn)動(dòng)遲緩）發(fā)生率減少72%。該方法基于肥大細(xì)胞脫顆粒釋放組胺的免疫機(jī)制，通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)敏相關(guān)基因（如IL-4、IL-13）表達(dá)變化實(shí)現(xiàn)機(jī)制驗(yàn)證。相較于豚鼠皮膚致敏實(shí)驗(yàn)，斑馬魚(yú)模型可避免個(gè)體差異導(dǎo)致的假陰性結(jié)果，且實(shí)驗(yàn)周期從42天縮短至7天。目前，完美、養(yǎng)生堂等企業(yè)已將斑馬魚(yú)抗過(guò)敏評(píng)價(jià)納入產(chǎn)品備案體系。通過(guò)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)，可以評(píng)估化妝品對(duì)斑馬魚(yú)的毒性和副作用，有助于確保安全性。

研究人員發(fā)現(xiàn)，離體培養(yǎng)48小時(shí)的全層皮膚可保持屏障特性，且能對(duì)不同強(qiáng)度的屏障破壞做出反應(yīng)，使用膠帶剝離或4小時(shí)十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過(guò)破壞皮膚結(jié)構(gòu)、促進(jìn)炎癥因子IL-6、IL-8的表達(dá)破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對(duì)離體皮膚進(jìn)行損傷造模，PPAR-α激動(dòng)劑RFV3可通過(guò)增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達(dá)來(lái)促進(jìn)離體皮膚的屏障修護(hù)過(guò)程[”。離體皮膚模型還被用來(lái)評(píng)估清潔產(chǎn)品的功效，ZHOU等人通過(guò)對(duì)沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進(jìn)行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，與水對(duì)照和沐浴露A處理相比，經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后，顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達(dá)明顯減少，證明沐浴露B對(duì)皮膚屏障具有破壞作用，此外，使用MTT檢測(cè)離體皮膚的組織活力也是用來(lái)評(píng)價(jià)皮膚屏障修護(hù)功效的重要指標(biāo)。通過(guò)斑馬魚(yú)實(shí)驗(yàn)，科學(xué)家們可以評(píng)估產(chǎn)品對(duì)斑馬魚(yú)的毒性和副作用，有助于確保產(chǎn)品的安全性。化妝品做保濕功效測(cè)試

人們渴望擁有明亮、均勻的肌膚，美白化妝品一直以來(lái)都備受關(guān)注?；瘖y品新原料評(píng)價(jià)公司

斑馬魚(yú)尾部脫水皺縮模型是評(píng)估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3，與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實(shí)驗(yàn)中，將斑馬魚(yú)胚胎置于高滲氯化鈉溶液中，尾部因脫水發(fā)生皺縮，通過(guò)顯微鏡測(cè)量尾部面積變化并檢測(cè)aqp3、has3基因表達(dá)量。例如，某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚(yú)尾部面積縮小抑制率達(dá)65%，同時(shí)aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍，證實(shí)其強(qiáng)的效保濕能力。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心等機(jī)構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程，成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)?；瘖y品新原料評(píng)價(jià)公司