TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長(zhǎng)450nm處有比較大消光系數(shù),如果HRP量少,H:O:和TMB過量時(shí),則形成藍(lán)色的陽(yáng)離子根。降低pH,即可使藍(lán)色的陽(yáng)離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此,450nm和492 nm兩個(gè)波長(zhǎng)是目前ELISA測(cè)定常用的。各種酶標(biāo)儀都配有放置濾光片的可自動(dòng)轉(zhuǎn)換的部件,可以同時(shí)安裝6~8片濾光片,所配備的濾光片均應(yīng)包括上述兩個(gè)波長(zhǎng),有的酶標(biāo)儀以490nm濾光片替代492nm濾光片,影響不大。除了這兩個(gè)基本濾光片外,考慮到雙波長(zhǎng)比色的需要,還應(yīng)有620nm或630nm或650nm和405nm波長(zhǎng)的濾光片,其他濾光片可根據(jù)自己的需要選擇。有時(shí),有的實(shí)驗(yàn)室希望用酶標(biāo)儀作微量生化測(cè)定,故酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家對(duì)其生產(chǎn)的酶標(biāo)儀擴(kuò)展了紫外檢測(cè)功能,此時(shí)需要一個(gè)340 nm波長(zhǎng)濾光片。此時(shí),酶標(biāo)儀的測(cè)定波長(zhǎng)范圍就成為340—750nm或800nm。上海多功能酶標(biāo)儀K3 Plus酶標(biāo)儀的通用內(nèi)置軟件允許采用終點(diǎn)法及動(dòng)力學(xué)讀取模式。
在雙波長(zhǎng)測(cè)定中,減少了測(cè)定干擾和電路干擾,因此測(cè)定結(jié)果比單波長(zhǎng)測(cè)量明顯好轉(zhuǎn)。由于液體表面張力的不同,導(dǎo)致單波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)的誤差較大。并且用不同的洗滌劑會(huì)影響到加入底物和終止液后的液面情況,用加入表面活性劑的洗滌液清洗后,形成的液面更凹,對(duì)單波長(zhǎng)檢測(cè)的影響更大,并且與表面活性劑的濃度成正比。而且中性蒸餾水洗滌后,單、雙波長(zhǎng)檢測(cè)的結(jié)果基本一致。利用雙波長(zhǎng)檢測(cè),不會(huì)影響檢測(cè)靈敏度。建議在進(jìn)行酶聯(lián)免疫檢測(cè)時(shí),酶標(biāo)儀比色應(yīng)該優(yōu)先雙波長(zhǎng)。這樣可以提高臨界值處標(biāo)本的分析正確度,減少實(shí)驗(yàn)誤差。酶標(biāo)儀內(nèi)置濾光片輪,可選擇試驗(yàn)所需的不同波長(zhǎng)的濾光片來進(jìn)行分光。
合適的軟件功能對(duì)于ELISA定量測(cè)定同樣很重要。有研究表明,四參數(shù)方程能較好地反映免疫測(cè)定的劑量反應(yīng)曲線,*為適合于定量酶免疫測(cè)定的曲線擬合。因此,如目的是定量測(cè)定,則在酶標(biāo)儀的軟件功能中,要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他諸如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算,則可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定,如兼用于微量生化測(cè)定,則此類回歸計(jì)算就很有必要。此外,酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、凝集反應(yīng)測(cè)定所需的軟件是否應(yīng)具備,當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類軟件一般都較為昂貴,酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備,如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要,就不必強(qiáng)求這種軟件功能。酶標(biāo)儀可用于單克隆抗體篩分、凝血分靈敏度檢驗(yàn),以及其它需要進(jìn)行比色的分析工作中。上海多功能酶標(biāo)儀
寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀為8通道垂直光路光密度檢測(cè)儀,其設(shè)計(jì)目的是執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)的光度測(cè)量。上海多功能酶標(biāo)儀
上海寶予德科學(xué)儀器有限公司致力于醫(yī)藥健康,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量管理的追求。寶予德深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向?qū)?,為客戶提供高質(zhì)量的移液器,吸頭,酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)。寶予德致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗(yàn)。寶予德創(chuàng)始人高會(huì)東,始終關(guān)注客戶,創(chuàng)新科技,竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。